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免疫组化在感染性疾病病理诊断中的应用

2014-08-02 21:09  阅读(795)  评论(2)  分类:专业

      免疫组织化学简称免疫组化(IHC),是上个世纪70年代兴起的一种特殊染色技术。它是组织化学与免疫学融合的产物,利用抗原抗体反应的原理和单克隆或多克隆抗体,借助同位素、荧光分子、金属、酶(辣根过氧化物酶等)等标记物,通过显示系统,在组织和细胞原位显示抗原抗体反应结果,在肿瘤病理诊断中得到广泛应用。在感染性疾病中也有其独特作用,即在感染灶中检测到病原体,进行原位病因诊断。在某些情况下,检测病原体单凭常规技术和特殊染色还是不能确定,特别是病毒和原虫等寄生于细胞内的病原体。抗病毒、细菌、真菌和原虫的特异性抗体可以与病变组织中的相应病原体抗原原位结合,不但便于识别,也更准确,是继培养法这个金标准之后最特异的诊断手段。

      其实,早在上个世纪40年代,Coons等就开始用特异性抗体来检测病变组织中的肺炎双球菌抗原。随着IHC技术的发展与普及,越来越多的抗体被研制出来并投入商品化市场,为原位检测病原体抗原拓宽了范围,IHC已经成为感染病病理诊断和研究的重要手段。越来越多的特异性抗体可以用于检测和鉴别病灶中的相应病原体。美国已经研制出60多种微生物单克隆抗体(单抗)用于诊断和鉴定病原体。我国只进口少量微生物单抗,故在感染性疾病中的应用有限。

       免疫组化在感染性疾病的诊断中有如下特点:①可靠性,只要病变组织中存在病原体的抗原,经适当处理都能显示出来;②特异性,可以特异地识别出病原体中的抗原成分,根据抗原性鉴定病原体,针对性强,具有与病原微生物形态学检测同样的诊断意义;③敏感性,在组织形态发生改变之前就可以检测出来,还可以发现含量稀少的孢子;④适应性,在无法取得新鲜组织或无法培养的情况下,可利用冰冻切片和石蜡包埋的组织以及细胞学材料获得病因诊断,也适用于回顾性研究;⑤快速性,可以在一两个工作日内做出结果,可以尽早使疾病明确病因指导治疗;⑥安全性,操作安全,风险低,不存在职业性暴露于感染性病原体的危险。

       但是,免疫组化也有一定的局限性。在致病性细菌或真菌中广泛存在着交叉抗原,在使用某种抗体时,不论是单抗或多抗,都必须进行交叉反应实验,以了解抗体的特征。对抗体的有效性、特异性以及抗原决定簇的保留情况,都应当详细了解。有一些原虫、真菌或细菌,不要求对福尔马林固定和石蜡包埋的组织进行预处理,而另一些较小的病原体,如病毒、衣原体,需要进行预处理,以充分暴露抗原决定簇,增强其免疫反应强度。免疫组化的每一种方法,每一步骤,都可能影响到最后结果,因此必须按规范操作,加强质量控制。对于有着交叉反应的抗体,宜结合阳性对照、特殊染色和形态判断。

 

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