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如何制作一张好的淋巴结HE切片(4)
4.固定:如果前面说过的各个环节都能注意到并按照规范处理,那么固定环节将是决定HE切片质量的最重要因素,可以说在难以评判的淋巴结标本中,固定不佳排在第一位,而且一旦出了问题,是不可逆的过程。看下面这张淋巴结切片肉眼观:
可以看到不论是HE还是随后的免疫组化切片,组织好像‘化’了一样,可以想象镜下很难观察淋巴结结构,感觉组织切片变成了细胞学,甚至还不如细胞学,因为细胞的形态也看不清。这样的标本,即便是最终能做出诊断也需要技术人员和诊断医生浪费很多时间重新处理,加做许多本可以不做的辅助诊断检测,多个专家会诊,给患者造成金钱和时间上的损失。
这部分要说的重点是固定剂和固定时间。实际上很多固定液都能制备质量优良的淋巴结切片,下表给出各种常用固定液及其优缺点,希望能对该环节有所帮助。
由于固定液成分不同,有的固定时间较长,有的会影响后续分子检测。初看大家可能会觉得眼花缭乱,还要学习这么多东西吗?其实如果有时间好好看下,知道一些相关知识当然更好,不过从表中可以看出我们国内病理科最常用的10%中性福尔马林无论是对细胞形态还是免疫组化、分子检测等方面都能达到最优,除了固定时间长一些,所以在日常工作中一定要注意固定时间至少要12小时,最长到48小时可保留完好的形态和免疫组化需要的组织。我科通常是淋巴结当天取材,固定过夜,然后随第二天常规组织进行后面的流程,这样可保证淋巴结标本的充分固定时间,虽然出片晚了一天,但质量上去了,最终出报告的时间反而节省。在美国学习时为了尽快看到HE切片,会有一部分组织经B5固定,非常节省时间,可短时间内拿到切片,尽快开出免疫组化医嘱,可缩短报告时间,但国内很少有单位能做到,这也是我们和人家的差距。不过如果能把现在病理科常规福尔马林固定这部分工作做好,也基本能够满足淋巴结病变诊断的需求。
来源: 轻松诊断086
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