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如何制作一张好的淋巴结HE切片(5)
前面如果做到了取材规范,薄切组织块,继而组织得到了很好固定,那么后续的步骤——脱水、透明、浸蜡和切片染色等就依赖于责任心强、技术过硬的病理科技术员了。
5.脱水、透明和浸蜡:这些步骤实际上并无特别多的技术含量,有一些规模很小的医院可能还是手动操作,而大多数医院自动脱水机已经应用越来越广泛。但不管手工还是自动,关键是要注意液体的更换,不是简单地以时间作为标准,需要根据处理标本块的数量进行调整,还要注意环境季节等因素,比如环境潮湿可导致液体中水分的增加而降低脱水的效果,所以一定要把这些工作做细做到位,这里最重要的应该是技术员的责任心了。
另外还有一点——成本核算,个人对这些步骤的体会是宁可提高换液的频次,也不要为节省一些试剂而影响切片的质量,这一点对某些单位非常重要,因为病理技术人员掌管这些环节,他们可能更为关注科室的成本核算,毕竟国内病理科经济收入在医院普遍较低,受重视程度差,所以减少一些支出可相应提高一些大家的收入。这种现状可以理解,但有时危害很大,晚换几天液,看上去省了几瓶乙醇钱,但可能导致HE质量不好,要加做很多工作,有些免疫组化还需要重复染色,但不能因为重复就多收检测费用吧,那么这些多出的项目成本都会加诸在病理科,而且费用远远高于前面省下的酒精等试剂钱,所以希望大家好好算算这笔账,而且最重要的是可能延长出具报告的时间,甚至影响诊断的准确性,自然临床医生和患者都不会满意,这样看是不是极为‘得不偿失’呢?
6.切片、染色:这里主要强调淋巴结切片难度较大,要薄切(3um),最好由经验丰富的技术员来完成,用最锋利的刀片非常重要,可以有效避免产生刀痕,另外就是水温高会导致切片裂痕,还有避免气泡产生,HE染色要做到‘红蓝鲜明’等等。毕竟不是专门的病理技术讲座,个个环节这里不加赘述,下表总结了质量欠佳切片产生的问题和可能的原因,方便大家查阅。
相比前面的取材和固定,这里比较让人欣喜的一点是,这些步骤如果出现问题可以重新来过,也就是说过程是可逆的,比如下图左侧刀痕很多,细胞形态不易辨认;右侧则是同一蜡块的重新切片,质量明显提高,不会影响最后的诊断。
当然这需要诊断医生和技术人员多多沟通,共同努力,必要时可以一起观察切片,找出问题所在,那么一定能够做出一张非常棒的淋巴结HE切片,使淋巴结病理诊断的物质基础更为牢固!
来源: 轻松诊断086
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