2.冰冻的问题：这部分和临床及病理医生均有关系，众所周知，即便是常规的石蜡切片，淋巴瘤的诊断也极具挑战性，冰冻切片制备过程中会产生许多人为假象，那么基于冰冻切片诊断淋巴瘤就非常危险，所以尽管有些类型淋巴瘤在冰冻切片可以初步判断，但临床医生一定要明白基于冰冻切片的淋巴瘤诊断和分型是不可靠的，所以外科医生一定要掌握送冰冻的指征。而且对于术前就考虑淋巴瘤，特别是组织比较小的时候，要避免术中冰冻，因为冰冻会影响石蜡切片和后续免疫组化的染色效果，这样送冰冻的结果是术中结果不可靠，术后很可能由于切片质量欠佳也不能准确诊断和分型，最终的结果很可能手术白做，需要再取样本，这样很难与患者及家属交待。

对病理医生来说，接到冰冻标本是被动的，必须要出具报告，这时取材医生要注意临床诊断，如果是考虑癌，当然要把典型组织做冰冻以保证进一步手术的方向正确，但如果考虑淋巴瘤，则要保证留足常规石蜡切片的组织，我曾见过别家医院的会诊病例，实际标本不小，但遗憾的是病理医生把所有组织都做了冰冻，出具了怀疑淋巴瘤的冰冻报告，最后的石蜡和免疫组织切片质量都非常差，诊断依然是模棱两可。当然这里有个前提，临床医生要提供完整的信息，否则病理医生就会非常盲目，这里也更看出切片和许多环节有关，所以HE切片质量的提高非常需要多科的合作。

至于病理诊断医生，一定要注意不要过于自信，仅凭冰冻HE形态就做出淋巴瘤诊断，甚至进行分型，尽管前面也讲了临床医生如何看待淋巴瘤的冻冰报告，但并不是所有的临床都能做到，千万不要忘了‘病理医生敢诊，临床医生就敢治’，设想一下，如果冰冻报告了DLBCL，做完常规HE再加做免疫组化，出正式报告大概是一周之后了，但如果诊断有偏差，冒进的临床医生一周期的化疗都打完了，那么这个锅一定会背在病理医生身上，细思极恐啊！所以奉劝病理医生一定要注意保护自己，千万不要做‘无知者无畏’的事情。

说了半天，还是举例说明为何把冰冻单独作为拿出来作为一讲，下面两张图对比一下冰冻对HE形态和免疫组化效果的影响。下图为HE切片。左侧冰冻后石蜡切片，细胞收缩，核结构不清，核浆比也看不太清，如果是淋巴瘤，仅从形态不易分辨归属为小细胞类，还是大细胞类；右侧为同一标本未经冰冻组织的石蜡切片，可很清楚看到细胞较大，大多数细胞核仁明显，可见到核分裂像；如果CD20阳性，归入大细胞淋巴瘤无太大问题。

下图为Ki67染色。左侧为冰冻后组织，染色模糊，阳性信号难辨；右侧为同一标本未经冰冻组织，非常清楚可判读为Ki67高表达。

        当然上面给出的是典型图片，有时不一定差距这么大，也可做出准确诊断。但是冰冻对后续切片质量的不良影响是一定的，既然如此，为何我们不力争切片做到最优，让诊断更为扎实可靠呢？

来源： 轻松诊断086