血液肿瘤可能会出现不同基因或染色体片段的缺失，如MDS（骨髓增生异常综合症）和AML（急性粒细胞白血病）可能出现5q-、7q-和20q-，CML（慢性粒细胞白血病）可能出现ASS基因缺失，慢性淋巴细胞白血病可能出现13q-、P53和ATM基因缺失，MM（多发性骨髓瘤）可能出现13q-和P53基因缺失等等。这些染色体片段和基因的缺失，FISH检测探针为某个染色体片段（几百kb长），可能会设置相应的着丝粒探针或区域片段探针作为对照。

以7q基因缺失检测探针（用于7q-的检测，含GSP D7S486和CSP7两个探针，CSP7为对照）和MM组合试剂盒中的P53/D13S319杂交液（用于P53基因和D13S319片段缺失的检测，即检测17p-和13q-，含有GSP P53和GSP D13S319两个探针，都具有检测意义）为例。

1、7q缺失检测探针（含对照，判读可类推5q-、6q-、P53和ATM等基因缺失检测探针）

①探针设计：D7S486标红色，CSP17（17号着丝粒探针）标绿色

②正常信号细胞：2红2绿

典型异常（阳性）信号细胞：1红2绿（7号染色体长臂缺失），1红1绿（整个7号染色体缺失，当然长臂也缺失）

③阈值设定：随机选取10 例以上的正常骨髓细胞涂片或者正常外周血细胞涂片当阴性质控片，每张阴性质控片随机计数200 个细胞，分别计算出现各类型FISH 阳性细胞的数目及百分比，统计百分比的平均值及标准差，阴性阈值设定为平均值+3 倍标准差。

④计数判读：计数200 个细胞，出现2红2绿信号类型的细胞记为FISH 阴性细胞，出现1红2绿或1红1绿信号类型的细胞记为FISH 阳性细胞

a) 若出现FISH 阳性细胞的比例大于阴性阈值时，判断为FISH 阳性；

b) 若出现FISH 阳性细胞的比例小于阴性阈值时，判断为FISH 阴性；

c) 若出现FISH 阳性细胞的比例等于阴性阈值时，应加大计数数目或分析整张片子（≥500个细胞），如果仍小于或等于阴性阈值，视为FISH 阴性；否则视为FISH 阳性。

⑤计数及判读注意：

a) 若无特殊情况，计数时只计数2G2O、2G1O和1G1O的信号；

b) 若有特殊情况，某一特殊信号出现比例20%以上，最好查阅文献或相关材料验证；

c) 红绿信号都出现的方可统计，若出现大比例（20%以上）没有红色或没有绿色或两者都无的情况，可能是样本或实验条件影响，最好用杂交信号很好的样本行对照再做。

⑥举例：计数时同一信号类型的细胞可用“正”计数表示（温馨提示：为提高效率，针对常见信号类型和阴性细胞可用计数器进行计数，而不常见或类型较少用正号记录）

计数情况：

结果：

2G1O阳性细胞比例=150/（55+150+1）=72.8%，大于阈值，7q-阳性

1G1O阳性细胞比例=1/（55+150+1）=0.5%，小于阈值，-7阴性

此例样本为7q-阳性

⑦阈值参考：参考文献，阈值6%。

2.、P53/D13S319杂交液（MM组合试剂盒的杂交液I，两个探针都有检测意义，可类推MDS组合试剂盒的CSP12/D20S108、MM的RB1/1q21等探针）

①探针设计：GSP P53标绿色，GSPD13S319标红色，判读时红绿单独计数

②正常信号细胞：2G2O

典型异常（阳性）信号细胞：1G2O（P53缺失，D13S319正常），2G1O（P53正常，D13S319缺失），1G1O（P53和D13S319都缺失）

③阈值设定：随机选取10 例以上的正常骨髓细胞涂片或者正常外周血细胞涂片当阴性质控片，每张阴性质控片随机计数200 个细胞，分别计算出现各类型FISH 阳性细胞的数目及百分比，统计百分比的平均值及标准差，阴性阈值设定为平均值+3 倍标准差。

④计数判读：计数200 个细胞，出现2红2绿信号类型的细胞记为FISH 阴性细胞，出现1绿n红的计为P53缺失的FISH阳性细胞，n绿1红的计为D13S319缺失FISH 阳性细胞

a) 若出现FISH 阳性细胞的比例大于阴性阈值时，判断为FISH 阳性；

b) 若出现FISH 阳性细胞的比例小于阴性阈值时，判断为FISH 阴性；

c) 若出现FISH 阳性细胞的比例等于阴性阈值时，应加大计数数目或分析整张片子（≥500个细胞），如果仍小于或等于阴性阈值，视为FISH 阴性；否则视为FISH 阳性。

⑤计数及判读注意：

a) 若无特殊情况，计数时只计数2G2O、1G2O、2G1O和1G1O的信号；

b) 若有特殊情况，某一特殊信号出现比例20%以上，最好查阅文献或相关材料验证（P53可能会扩增）；

c) 红绿信号都出现的方可统计，若出现大比例（20%以上）没有红色或没有绿色或两者都无的情况，可能是样本或实验条件影响，最好用杂交信号很好的样本行对照再做。

⑥举例：计数时同一信号类型的细胞可用“正”计数表示（温馨提示：为提高效率，针对常见信号类型和阴性细胞可用计数器进行计数，而不常见或类型较少用正号记录）

计数情况：

结果：

1GnO的阳性细胞比例=（150+1）/（55+150+1+1）=72.9%，P53缺失阳性

nG1O的阳性细胞比例=（1）/（55+150+1+1）=0.5%，D13S319缺失阴性

此例样本为P53缺失，D13S319正常

⑦阈值参考：参考文献，阈值6%。