血液肿瘤可能会出现某些基因断裂后易位重排，如嗜酸粒增多症可能出现PDGFRB、FGFR1等基因断裂，MDS（骨髓增生异常综合症）可能出现EVI基因断裂，AML（急性粒细胞白血病）可能出现RARA、CBFB、MLL、EVI等基因断裂，ALL（急性淋巴细胞白血病）可能出现ETV6、E2A、MYC、IGH、MLL等基因断裂，MM（多发性骨髓瘤）可能出现IGH、CCND1、CCND3、等基因断裂等等。这基因的断裂，FISH检测探针为断裂的两端（各几百kb）标记不同的颜色（红和绿）。

以MLL（又名KMT2A）基因断裂检测探针（用于MLL基因断裂的检测，含GSPMLL一个探针，断裂两端标记红绿两种颜色）为例。

MLL基因断裂检测探针（含对照，判读可类推其余断裂探针）

①探针设计：MLL断裂两端标记红绿两种颜色

②正常信号细胞：2F（融合）

典型异常（阳性）信号细胞：1红1绿1融合，可能出现n红m绿k融合（n和m≥1）的阳性信号情况

③阈值设定：随机选取10 例以上的正常骨髓细胞涂片或者正常外周血细胞涂片当阴性质控片，每张阴性质控片随机计数200 个细胞，分别计算出现各类型FISH 阳性细胞的数目及百分比，统计百分比的平均值及标准差，阴性阈值设定为平均值+3 倍标准差。

④计数判读：计数200 个细胞，出现2红2绿信号类型的细胞记为FISH 阴性细胞，出现可能出现n红m绿k融合（n和m≥1）信号类型的细胞记为FISH 阳性细胞

a) 若出现FISH 阳性细胞的比例大于阴性阈值时，判断为FISH 阳性；

b) 若出现FISH 阳性细胞的比例小于阴性阈值时，判断为FISH 阴性；

c) 若出现FISH 阳性细胞的比例等于阴性阈值时，应加大计数数目或分析整张片子（≥500个细胞），如果仍小于或等于阴性阈值，视为FISH 阴性；否则视为FISH 阳性。

⑤计数及判读注意：

a) 若无特殊情况，计数时只计数nOmGkF（n≥1，m≥1）的信号；

b) 若有特殊情况，某一特殊信号出现比例20%以上，最好查阅文献或相关材料验证，如IGH断裂可能出现1F1O（1融合1红）不典型异常的断裂阳性信号；

c) 红绿信号都出现的方可统计，若出现大比例（20%以上）没有红色或没有绿色或两者都无的情况，可能是样本或实验条件影响，最好用杂交信号很好的样本行对照再做。

⑥举例：计数时同一信号类型的细胞可用“正”计数表示（温馨提示：为提高效率，针对常见信号类型和阴性细胞可用计数器进行计数，而不常见或类型较少用正号记录）

计数情况：

结果：

1O1G1F阳性细胞比例=150/（55+150+1）=72.8%，大于阈值，MLL断裂阳性

此例样本为MLL基因断裂

⑦阈值参考：参考文献，断裂阈值10%。