我的博文
病理技术复习小结
1、伊红染液陈旧可致染色困难,可滴入一滴冰醋酸以恢复染色力,但若加入过量或反复多次加入冰醋酸,伊红会出现沉淀,且染色力减弱;
2、若伊红过染,掩盖核的蓝色,可水洗切片或置80%乙醇脱水时间延长数秒钟是过染伊红脱色;
3、组织脱水不充分的处理:溶化蜡块后,将组织投入二甲苯内溶解和清除石蜡,(二级二甲苯,30min并轻轻搅动),再投入无水乙醇洗去二甲苯,最后按常规脱水、透明和浸蜡、包埋。
4、乙醇用75%的固定小标本,乙醇固定标本可致细胞核的染色不良,更影响免疫组化的染色;高浓度乙醇固定,将使组织表层迅速固缩和强烈脱水,形成一层硬膜,同时影响深层组织的固定;镜下表层细胞融合深染,与其下组织分界清楚。
5、AF液:95%乙醇(A)90ml,浓甲醛(F)10ml混合配制而成。此固定液兼有脱水作用,也适用于皮下组织中肥大细胞的固定。固定后可直接用90%乙醇进行脱水处理。
6、AFA液:95%乙醇或无水乙醇(A)85ml,浓甲醛(F)10ml,冰醋酸(A)5ml混合配制而成。常规石蜡切片因固定不佳,染色效果不满意,可在染色前用AFA液固定5min,效果会有明显改观。
7、在进入二甲苯透明前,需先经过无水乙醇和二甲苯的混合液30min,二甲苯1和2透明的总共时间须控制在1.5h之内
8、浸蜡每步1h,3-4步即可
9、酸类脱钙操作简单、价廉、脱钙时间较快。但脱钙时间若掌握不准确,容易破坏组织,胞核染色不良。
10、甲醛色素沉积(棕黑色无定形颗粒):在含血液丰富时常见,酸性甲醛与血红蛋白形成酸性甲醛正铁血红素复合物,此复合物又称甲醛色素或福尔马林复合物。一般甲醛固定含血液丰富的组织小于48h,此色素形成可减少。如已经形成可在切片、脱蜡至水化后,置95%乙醇苦味酸饱和液内处理5-30min即可溶解消失。
11、盐酸酒精后若染色过淡可重染苏木素,过深则可再置盐酸酒精中分化一次。盐酸酒精后需充分水洗,否则酸残留影响组织返蓝和褪色;碳酸锂返蓝后需充分水洗,否则碱残留影响组织伊红着色。
共0条评论