四、骨组织脱钙技术

    对于含骨质或钙化组织必须脱去钙质才能制片。脱钙液采用适当浓度的酸性液体。过去常用硝酸或盐酸，因酸性过强，影响胞核着色，效果不佳。目前使用30% - 50%甲酸脱钙液，视组织含钙量的多少，掌握浸泡时间，小标本只需几小时即可完成，较大的标本须锯成3 - 4mm的薄片，24小时内完成（较高硬度的标本可采取延时，必要时更换脱钙液的方法）。此外电解脱钙效果也可。近来脱钙方法又稍有政进，在甲酸液中加少许盐酸和磷酸缓冲液作为甲液；浓甲醛作为乙液；25%戊二醛作为丙液；三者按75ml：10ml：15ml混合后使用，结果切片完好，着色清晰，且可缩短脱钙时间。对科研标本、电镜标本，不受脱钙时间限制，用EDTA更为适宜。对作免疫组化的标本EDTA脱钙液加微波辐射技术可使骨组织的结构及蛋白抗原保存更好。一般甲醛固定的标本可封闭抗原影响效果，故应用枸橼酸盐与微波复合技术恢复抗原效果尤佳。