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经验 | ELISA、WB、Q-PCR采样及取样注意事项

2015-10-30 21:03  阅读(1150)  评论(0)  分类:专业

ELISA取样及运输注意事项

一、血清提取方法

1.全血促凝管取血,轻轻颠倒两三次,放置片刻让全血凝固,凝固后3000转15-30min离心取上清。

2.全血普通EP管取血,室温放置2h左右,让其凝固,凝固后3000转15-30min离心取上清。

特别注意:取血清避免震荡,以防止溶血,溶血会对结果有影响。

二、样本取量及运输

每个指标做单孔检测,一个样本需取血清30ul,3个复孔需90 ul,冰盒-20度中短时运输(小鼠建议采取摘眼球取血,如果血样有限在试验方案允许的前提下可以取多只小鼠血样混合)。

三、样本编号

样本标号:

组别及样本标号,要在管壁上标注清晰,特别注意6,9的区分,可以使用英文标注。

WB、Q-PCR取样及运输注意事项

一、细胞收集及保存

1、贴壁细胞胰酶消化后900转5min离心至管底(非贴壁细胞直接离心),弃上清,将细胞冻存与-80度长期保存,-20度,暂时保存。若用于Q-PCR尽量使用灭菌无RNA酶离心管,trizon或RNA样本保存液中-80度长期保存。

2、组织样本取样后立即-80或者液氮保存。后续用于Q-PCR的取样后立即存于液氮或者-80度环境中,或者放于有trizon或RNA样本保存液的灭菌无RNA酶离心管中-80度保存。

二、样本运输

短时2h左右冰袋或者液氮运输,干冰(干冰可以维持-70度)密封邮寄运输。

三、样本编号

组别及样本标号,要在管壁上标注清晰,特别注意6,9的区分,可以使用英文标注。

病理实验取样及实验注意事项

1、动物组织提取后(玉米粒大小即可)迅速保存于4%多聚甲醛中固定,管体标号,组织块尽量少带血液,或可以用多聚甲醛将样本稍作清洗,常温保存,常温运输。做电镜的样本由2.5%戊二醛固定于15ml离心管内,样本直径小于2mm,常温保存常温运输。

2、细胞样本制作成爬片后PBS浸润保存与细胞培养板内,密封常温运输。做电镜的细胞离心收集好后2.5%戊二醛固定,常温运输。

 

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