二、DNES细胞的分布和形态
    DNES细胞散在分布在人体不同组级和器官的上皮内。胰腺内分泌细胞除构成成千上万个胰岛外，还有不少散在在导管和腺泡上皮内。因此胰腺内分泌细胞（内分泌胰腺）从结构上说是处于成形的内分泌器官和散在的内分泌细胞之间的中间型。已知DNES细胞已有数十种。
    DNSE细胞光镜下为胞浆着色浅的透明细胞，以单个细胞形式夹杂在上皮细胞内亦可三五成群，普通HE染色很难鉴别。目前用于鉴别DNES细胞的方法有：①银染色；②电镜；③免疫组化；④原位杂交。
    DNES细胞经银染色可显嗜银性（argyrophilia）或亲银性（argentaffin）。显示嗜银性的染色方法有Grimelius、Bodian、  Sevier-Munger、  Hellstrom-Hellmas  和  Churukian-Schenk等方法。显示亲银性可用Masson Fontana方法。亲银反应特异性高但敏感性差。亲银细胞主要见于小肠。嗜银反应特异性差但很敏感，嗜银细胞分布广许多部位如胃、支气管、肺等处都有。
   【电镜】  下DNES细胞具功能活跃细胞的特征如有丰富的粗面内质网、核糖体、发达的高尔基体和明显的微丝-微管系统，最特殊的形态特点是有成簇的神经分泌颗粒。这些神经分泌颗粒有一个位于中央成偏位的不同电子密度和形态的核心，核心周围有一界膜包绕，核心与界膜之间有不同宽度的空晕( halo)。分泌颗粒的形态和大小变异很大，直径50nm-500nm，多数直径lOOnm-300nm。功能相同的细胞其分泌颗粒的形态和大小基本相同。胃肠道和其他管道器官上皮内的透明细胞电镜下有二种形态：一种为开放型，另一种为封闭型。开放型细胞呈三角形、烧瓶样或梨形，其宽底位于基底膜面，有一窄的颈部，迂回曲折地经过相邻细胞到达管道的腔面。腔面的细胞缘布有微绒毛和受体，所以细胞的腔面又称受体极。细胞核下方有神经分泌颗粒，高尔基体位于核上方。肽或胺类激素在粗面内质网和高尔基体内合成后储存在核下方的分泌颗粒内。分泌颗粒从细胞的底面和两侧面的下部释放至血液或细胞间隙。细胞颈部有紧密连接与相邻细胞相连。封闭型细胞极向不象开放型那样明显，与管腔不相连，其他超微结构与开放型同（图9-55）。
         图9-55  胃肠道及其他管道器官DNES细胞
      A.开放型  电镜下腔面的细胞缘有微绒毛，颈部有紧密连接，神经分泌颗粒垃于棱下方
      B．封闭型  除与管腔不相连外，其他超敦结构与开放塑同
    鉴别DNES细胞的首选方法是用特异的抗不同肽或胺类激素的抗体作免疫组化染色，可在同一器官或组织内鉴别出多种不同功能的DNES细胞。广谱的DNES细胞标记有：①神经元特异性烯醇酶(neuron specific enolase，NSE)是一种细胞浆(cytosolic)蛋白，由两个γ亚单位构成，NSE很敏感但不特异，一些非神经内分泌细胞和肿瘤亦与NSE抗体反应，所以NSE要与其他较特异的抗体如铬粒素（chromogranin）或TB2等结合染色；②铬粒素为酸性蛋白，与神经内分泌细胞的分泌颗粒有关：有3种铬粒素：chromoranin A，B（secretogranin I）和C(se-cretograninⅡ)，A用得最广。因铬粒素抗体与分泌小泡中的蛋白起反应，所以分泌小泡少的神经内分泌细胞或肿瘤可能出现假阴性；③突触素( synaptophysin)抗原是前突触小泡( presynaptic vesicles)膜的一个成分，突触素广泛分布于神经内分泌细胞、肿瘤和神经元中。④其他有蛙皮素( bombesin)、胃泌素释放肽(GRP)、Leu-7、TB2蛋白、PGP9.5蛋白和HISL-90等单抗。
    原位杂交对一些不含可测出量的蛋白-激素的神经内分泌细胞和肿瘤很有用。这种细胞和组织如能用原位杂交检测出有关蛋白-激素的mRNA则有助于鉴别诊断。原位杂交亦可用于获得关于细胞内激素合成的信息，以区别该细胞是合成还是摄取激素，因细胞内如检测出mRNA，则表明该细胞合成激素。原位杂交可与免疫组化结合以分析mRNA和蛋白被同一细胞同时的表达。原位杂交亦可用于证明某些肿瘤合成异位激素。原位杂交还可与电镜结合以研究特殊的激素合成的超徽结构部位。