我的博文
组织发脆的原因及解决方法
组织切片时组织很硬或切成粉末状,一般认为是脱水、透明时间过长,温度过高引起。
笔者认为,组织脱水、透明时间过长能引起组织发脆这个观点值得商榷,在常温下,只要组织固定充分,组织在各道乙醇内浸泡数日也不会发脆,而常规脱水处理总共几个小时的脱水时间更加不会造成组织发脆;二甲苯透明也是如此。而甲状腺、肝、腺瘤、小动物等组织发脆,其实和其自身的质地相关,是组织质地的正常表现,是蜡块过冰引起(这和冰冻切片时此类组织冷冻温度过低组织发脆的原理是一样的),和脱水、透明时间长没有任何关系。
还有一种是组织的假脆现象,是组织固定不充分的情况下,脱水轻度不足、乙醇处理时间太短或者浓度安排不合理,特别是低浓度乙醇脱水时间太短,乙醇没有充分渗透到组织中去,后面高浓度乙醇使蛋白质凝固,没有把水分全部置换出来,还留有少量的水分在组织中,蜡进入组织不彻底,没有完全起到支撑作用,导致切片时发脆。当组织较小或较薄时,残留少量水分,浸蜡时组织在蜡缸内高温烘烤,蜡内二甲苯将组织内水分析出,组织干燥变得很硬。
在日常工作中,如果使用包埋盒脱水,大小标本不分开脱水,关系也不大。在以往的脱水中,由于胃镜等小标本是用纸包的,大标本的组织都压在纸包上,纸包与纸包也粘在一起,导致纸包内的组织脱水不充分,切片时很硬、很脆,所以大家都认为这是由于组织脱水过度引起的,因此把大小标本分开处理。小标本分开后,处理的空间大了,试剂多了,纸包与纸包间不会紧密地粘在一起,所以脱水就比较容易,脱水的时间也可以短一点,而这与大小标本分开后脱水时间的变化并没有多大关系。
各种原因导致的固定不佳以及标本量过多、试剂量太少,都会引起组织脱水不佳,导致组织假脆或发硬。
细胞丰富、蜡块太冰是组织发脆的主要原因。放在冰水里1~2 分钟或者不冰是解决此类组织最好的切片方法。对于冰过的蜡块,可以边切边用嘴向蜡片吹气;或者用5%~10%稀氨水在蜡块切面上涂一下再切;也可用手蘸一下热水,摸一下切面再切,这样切都可能会增加切片的厚度,注意调低切片机的刻度。
因此,在日常工作中,我们要找到发生问题的真正原因,重新调整组织处理程序,正确处理好固定、脱水液浓度与时间的关系,找到不同组织与蜡块冷冻程度的关系,改变我们的蜡块冷冻习惯,才能彻底解决组织发脆现象。
【来自公众号 中华病理技术网】
扫码关注
共0条评论