现在，什么都提规范化，很多专家认为，只要厂家提供成品的试剂，照着做，就是规范化；用机器做就是规范化；搞几个操作流程，记录记录就是规范化，常规切片、免疫组化都是如此。个人认为，这些提法并不十分正确。

什么叫规范化：比如苏木素，每个人配出来效果都不一样，染色时间也不一样。然后，厂家就说，我们来配。厂家配出来就一样了吗？我相信一定也不一样，因为苏木素的配制和温度、时间、苏木素批号、氧化程度等等都有关系，就算你配出来是一样的，存放时间不一样，使用的气温不一样，切片的厚度不一样，染色时间都不一样。是不是用了厂家配的就是规范化了，就能用一个时间来规定就染好了？不会。其实说白了，是很多技术员懒，不愿意配而以。因为99％的情况下，厂里配的和你配的没区别，因为染色时间都不能固定，区别只是时间长短而以。那什么叫苏木素染色规范化？我认为，苏木素染色完成后必须用显微镜观察细胞核的深浅，并根据镜下的实际情况决定是否需要再染或分化，这才是规范化。

免疫组化存在的问题更多，有人提出来即用型抗体就是规范化。是不是这样的？就目前来说是不一定：即用型抗体的出现，推动了免疫组化在中国的普及化，为什么，因为中国的技术员素质低，不会配试剂，不愿配试剂，怕麻烦，现在也是如此。最好只要几种液体滴滴，免疫组化就做好了。即用型抗体正好满足了他们的要求，也正是这种宣传和教育，导致现在的很多技术员不懂什么叫稀释比，不懂一抗浓度与检测系统的敏感性是有相关性的。只知道买来按说明书做就行，结果是否正确也不知道。其实，这把中国病理技术员给害了。因为现在的免疫组化结果做出来五花八门，毛病很多就出在即用型抗体、出在技术员没有正规的培养和正确的思路，更没了解决问题的办法。用抗体原液的技术员都知道：一抗的浓度和检测系统的敏感性是要相互配合的：比如ER，用SP试剂盒，一般在1：80，用EnVision要1：50，用ChemMate EnVision 1：150 ，用PV9000 1：130；否则，就会出现假阳性（上背景）或假阴性（阳性细胞少）等等。然而，现在的试剂公司，它的即用型一抗只有一种浓度，然而它有多种检测系统，我不知道他们配的一抗是和那一个检测系统相匹配的，他们用不同的检测系统去适应同一种浓度的抗体，所以很多（应该说非常多）的单位做出来的结果都存在问题。更不要说还有不同的修复方法，不同的修复液，其强度都是不同的。

那什么叫规范化，我认为只有根据操作流程，在用不同的一抗稀释比，根据你的抗原修复方法、使用的检测系统、DAB敏感度相匹配，用强弱不同的组织做阳性、阴性对照做出的结果，那才叫规范化。而且，每次新进不同批号的抗体都要做对照（我们叫摸抗体稀释比、摸条件）。

有人说我们单位小，买不起原液，我告诉你，那是厂家忽悠你的，他们要朝三暮四的理论骗了你。因为稀释液的利润远远高于原液。他们没有告诉你，原液可保存几年，而稀释液只有半年左右。越是小单位偶尔用一下，越是要买原液，因为稀释液你可能用一次没就用了，原液买来放着，几年还能用。当然，一年内买几只抗体你可能觉得买稀释液便宜，但如果你根据原液的稀释比算一下，会发现二三年以后，你就上当了，因为稀释液要贵得多。

那么厂家应该怎么做？他们应该规定抗原修复方法和检测系统，然后选择一种与其相对应浓度的一抗，这样比较科学。目前，免疫组化机器染采用的就是这个模式，当然并不是简单使用配套试剂就一定能做出好的结果，机器也要根据染色强度用孵育时间来调整。手工的话那就更复杂了，但最起码正确率会高的多。免疫组化基础的原理和知识你必须懂，片子必须会看，抗原表达在那必须知道，最好知道什么肿瘤会表达，什么不会表达，出了问题应该知道问题在那儿、怎么解决。否则，你将永远是一个操作工。一个不懂诊断的技术员，一定成不了一个优秀的技术员。

所以，规范化不是我们想的那么简单，是科学地、认认真真地去做每一件事。

【来自公众号 中华病理技术网】

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