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荧光原位杂交技术如何在临床科室开展
FISH-荧光原位杂交
细胞遗传学定义
用特定荧光如生物素做探针,与靶DNA进行杂交,通过免疫细胞化学过程标记荧光素标记物,在荧光显微镜下观察探针标记的位点。
实验流程
FISH样本的制备--探针的制备--探针标记--杂交--(染色体显带)--荧光显微镜检测--结果分析
FISH优点
1.荧光探针商业化、采购方便、保存安全。
2.实验周期短、特异性好、定位准确。
3.可定位1KB的DNA序列,灵敏度高
4.一次染色可获取24种不同颜色的染色体,对于隐匿性的缺失、异位诊断准确。
FISH技术适合医院那些单位开展??
一切与染色体相关的科室。特别是病理科、血液科、妇产科、生殖中心(产前诊断、植入前诊断)等。
开展FISH技术需要准备那些工作?
已病理科举例:
1、FISH是荧光表现,因为荧光显微镜比不可少。
通常,荧光显微镜可选择德系(Leica、zeiss)或日系(olympus、nikon)。当然要根据科室的经费来定,显 微镜最重要的是物镜!!!,同倍数物镜也有等级之分,因此采购时需要注意。
2、分析软体。现在医院给病人做检测后,需要发诊断报告,一份漂亮的诊断报告对于医师来说,很是重要。因 此,染色体分析分析在有实力的单位已越来越普遍。
软体有进口和国产2类。国产的分析软体确实不敢恭维,当然,一些资金实力薄弱的单位也只能委曲求全了。
3.探针
我们常说的FISH Probe。FISH 探针发展到现在,种类越来越多。已我个人看法,主要分为以下2类:
1、血液类探针
血液类探针诸如血液病类,如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤等。其次,产前诊断和产后筛查类我也归到此类,因为也是做细胞类,非组织学类。
2、实体肿瘤类探针
实体瘤类探针,特别针对医院的病理科,病理科在检测乳腺癌、子宫颈癌、甲状腺癌等方面。
最后,是探针的Price,由于种类不同,价格都有差异,这个就要去咨询卖家了!
4.技术人员
这里需要重点提示一下,FISH技术人员的重要性!!
有人说,FISH不难,很容易做。从我接触到的实际情况来看,目前,在国内开展FISH技术检测这块,真正娴熟的技术人员还是较少!,因此,培养一名技术人员是非常重要的。
5.暗室
大家都知道,荧光怕见光,导致荧光萃灭。因为暗室是比不可少。暗示面积至少可已放置荧光显微镜、水浴锅、杂交仪等设备。一般10-15平方对于一般的科室已足够!
以上是个人的观点,如有不同意见,欢迎交流!!
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